Applied Microbiology in Food Industry

fa جداسازی وشناسایی گونه های جنس لاکتوباسیلوس جدا شده از واژن زنان سالم وبررسی فنوتیپی وژنوتیپی مقاومت آنتی بیوتیکی آنها Isolation and identification of Lactobacillus species isolated from the vagina of healthy women and phenotypic and genotypic study of their antibiotic resistance میکروبیولوژی مواد غذایی General پژوهشي Research یکی از عوامل مهم در استفاده از پروبیوتیکها، جداسازی و شناسایی سویههای جدید بدون برخورداری از مقاومت های درویی با پتانسیل پروبیوتیکی میباشد لذا هدف تحقیق حاضر جداسازی و شناسایی باکتریهای متعلق به جنس  لاکتو باسیلوس وارزیابی مقاومت دارویی آن ها از زنان سالم مراجعه کننده به کلینیک درمان ناباروری مهررشت بود.  50 نمونه تهیه و پس از کشت نمونهها روی محیط کشت  MRS آگار، شناسایی مورفولوژیک و بیوشمیایی جدایه ها انجام گردید. تستهای تخمیر قند، همولیزوکاتالاز، تحمل اسید و مقاومت در برابر نمکهای صفراوی انجام شد. مقاومت به آنتی بیوتیکهای رایج از نظر فنوتیپی با روش دیسک دیفیوژن وتعیین MIC وحضور ژنهای مقاومت در لاکتوباسیل های جداسازی شده بررسی شد. در نهایت حساسترین سویه ها ی برخوردار از خواص پروبیوتیکی با استفاده از واکنش PCR ژن 16SrRNA، شناسایی مولکولی شدند. 12 ایزوله که رشد بهتری داشتند و در رنگآمیزی گرم به صورت باسیلهای گرم مثبت مشاهده شدند.شناسایی فنوتیپی جنس لاکتوباسیلوس را تایید نمود. تست تخمیر قندها برای همه ایزولهها مثبت و تست همولیز برای همه آنها منفی بود. ایزولهها همچنین قادر به رشد در محیط اسیدی و محیط حاوی نمکهای صفراوی بودند. نتایج نشان داد برترین جدایه در روشهای فنوتیپی فاقد مقاومت اکتسابی ودر ارزیابی ژنوتیپی فاقد ژنهای آن بود . حساسترین ایزولهی جداسازی شده  به انتی بیوتیکهای رایج لاکتوباسیلوس کرایسپاتوسبود. با انجام آزمایشات بیشتر در رابطه با خواص پروبیوتیکی این میکروارگانیسم و اثرات سلامتیبخش آن بصورت درون موجودی میتوان از آن به عنوان یک مکمل درمانی جهت مصارف دارویی مانند شیافهای واژینال استفاده نمود.   One of the important factors in the use of probiotics is the isolation and identification of new strains without drug resistance with probiotic potential. The aim of this study was to isolate and identify bacteria belonging to the genus Lactobacillus and evaluate their drug resistance from healthy women referred to the Mehr infertility treatment clinic of Rasht. 50 samples were prepared and after that they were cultured on MRS agar. Also, morphological and biochemical identification of the isolates was performed. Sugar fermentation, hemolysis, acid tolerance and resistance to bile salts tests were performed. Resistance to common antibiotics was examined phenotypically by the disk diffusion method and MIC determination and the presence of resistance genes in the isolated lactobacilli were genetically assayed. Finally, the most sensitive strains with probiotic properties were molecularly identified using the 16SrRNA gene PCR reaction. 12 isolates had grown better and were observed as gram-positive bacilli in Gram stain. Phenotypic identification confirmed the genus Lactobacillus. Sugar fermentation test was positive and hemolysis and catalase test was negative for all of isolates. The bacteria were also able to grow in acidic pH and bile salts. The best isolate in phenotypic methods and molecular analysis lacked acquired drug resistance genes was identified as Lactobacillus crispatus. By conducting further complementary Invivo tests on the probiotic properties of this microorganism and its health-promoting effects, it can be used as a therapeutic supplement for medicinal purposes such as vaginal suppositories.   خواص پروبیوتیکی,لاکتوباسیلوس,مقاومت دارویی,واژن Probiotic properties,Lactobacillus,Drug resistance,Vagina 107 128 http://amfi.ir/browse.php?a_code=A-10-267-1&slc_lang=fa&sid=1 Azadeh Eftekhari آزاده دخت افتخاری فومنی eftekhari_azadeh@yahoo.com 10031947532846001313 10031947532846001313 No Department of Biology, Ra.C., Islamic Azad University, Rasht, Iran گروه زیست‌شناسی، واحد رشت، دانشگاه آزاد اسلامی، رشت، ایران Masoumeh Anvari معصومه انوری manvari1344@gmail.com 10031947532846001314 10031947532846001314 Yes Department of Biology, Ra.C., Islamic Azad University, Rasht, Iran گروه زیست‌شناسی، واحد رشت، دانشگاه آزاد اسلامی، رشت، ایران Meysam Hasannejad-Bibalan میثم حسن نژاد بی بالان meysam.hasannejad@gmail.com 10031947532846001315 10031947532846001315 No Department of Microbiology, School of Medicine, Guilan University of Medical Sciences, Rasht گروه میکروب‌شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گیلان، رشت، ایران