Applied Microbiology in Food Industry

fa شناسایی باکتری‌های قابل کشت و غیرقابل کشت در مرغ‌های گوشتی با بهره‌گیری از روش‌های شیمیایی و مولکولی: رویکردی نوین در مدیریت ایمنی غذایی Identification of Cultivable and Non-Cultivable Bacteria in Broiler Chickens Using Biochemical and Molecular Techniques: A Novel Approach to Food Safety Management میکروبیولوژی مواد غذایی General پژوهشي Research  آلودگی میکروبی لاشه طیور یکی از چالش‌های اساسی در ایمنی مواد غذایی است. حضور باکتری‌های بیماری‌زای غیرقابل‌کشت در محصولات گوشتی، به‌دلیل مقاومت در برابر شرایط استرس‌زا، خطر بالقوه‌ای برای سلامت عمومی دارد. شناسایی این باکتری‌ها با روش‌های مستقل از کشت، نقش مهمی در پایش ایمنی مواد غذایی دارد.این مطالعه باهدف شناسایی سویه‌های باکتریایی قابل‌کشت وغیرقابل‌کشت در گوشت مرغ بسته‌بندی‌شده و غیر بسته‌بندی‌شده عرضه‌شده در شهرستان بوانات، با استفاده از روش‌های کلاسیک و مولکولی، با تمرکز بر ژن‌های مرتبط با استرس محیطی RpoS و OxyR بود. دراین پژوهش۱۰۰ نمونه مرغ تازه و منجمد از برندهای مختلف جمع‌آوری شد. جداسازی باکتری‌ها با محیط‌های کشت اختصاصی و آزمون‌های بیوشیمیایی انجام گرفت. استخراج DNA ژنومی و واکنش زنجیره‌ای پلیمراز با پرایمر یونیورسالSrRNA١٦و پرایمرهای اختصاصی ژن‌های هدف انجام گرفت. محصولات حاصل با الکتروفورز ژل آگارز و تعیین توالی DNAبررسی شدند. نتایج نشان داد اشریشیا کولی(۲۰درصد)و استافیلوکوکوس(۱۶درصد) به‌ترتیب شایع‌ترین باکتری‌های گرم منفی وگرم مثبت بودند. جدایه‌های غیرقابل‌کشت شامل پزودوموناس، سایکروباکتر و اسینتوباکتر بود. حضور ژن‌های RpoS و OxyR در برخی جدایه‌ها تأیید شد که نشان‌دهنده توانایی آن‌ها در ورود به مرحله غیرقابل‌کشت و مقاومت در برابر شرایط استرس‌زا بود. نتایج حاصل بیان کننده این است که گوشت مرغ عرضه‌شده در منطقه بوانات دارای تنوع بالایی از باکتری‌های بیماری‌زا است که می‌تواند تهدیدی جدی برای سلامت مصرف‌کنندگان باشد. شناسایی سویه‌های غیرقابل‌کشت و ژن‌های مرتبط با استرس، ضرورت استفاده از روش‌های مستقل از کشت را در پایش ایمنی گوشت طیور برجسته می‌سازد. Microbial contamination of poultry carcasses represents a major challenge in food safety. The presence of viable but non-culturable (VBNC) pathogens in meat products—due to their resistance to environmental stressors—poses a potential threat to public health. Detection of these bacteria through culture-independent methods plays a crucial role in food safety monitoring. This study aimed to identify both culturable and non-culturable bacterial strains in packaged and unpackaged chicken meat sold in Bavanat County, using classical and molecular techniques, with a focus on stress-related genes RpoS and OxyR. A total of 100 fresh and frozen chicken samples from various brands were collected. Bacterial isolation was performed using selective media and biochemical tests. Genomic DNA extraction and polymerase chain reaction (PCR) were conducted using universal 16S rRNA primers and specific primers targeting the stress-related genes. PCR products were analysed via agarose gel electrophoresis and DNA sequencing. The results revealed that Escherichia coli (20%) and Staphylococcus spp. (16%) were the most prevalent Gram-negative and Gram-positive bacteria, respectively. Non-culturable isolates included Pseudomonas, Psychrobacter, and Acinetobacter. The presence of RpoS and OxyR genes in some isolates confirmed their ability to enter the VBNC state and resist stressful conditions. These findings indicate that chicken meat sold in Bavanat harbours a diverse range of pathogenic bacteria, which may pose a serious risk to consumer health. The identification of VBNC strains and stress-related genes underscores the importance of employing culture-independent methods in poultry meat safety surveillance.   : مرغ,باکتری‌های غیر قابل کشت,باکتری‌های قابل کشت,واکنش زنجیره‌ای پلیمراز,Rpos,oxyR. Chicken,non-culturable bacteria,culturable bacteria,polymerase chain reaction,Rpos,oxyR. 79 97 http://amfi.ir/browse.php?a_code=A-10-132-1&slc_lang=fa&sid=1 Fatemeh Khakinahad فاطمه خاکی نهاد khakinahadfatemeh@gmail.com 10031947532846001349 10031947532846001349 No Department of Microbiology, Shi.C., Islamic Azad University, Shiraz, Iran گروه میکروبیولوژی، واحد شیراز، دانشگاه آزاد اسلامی، شیراز، ایران Nima Bahador نیما بهادر nima44bahador@gmail.com 10031947532846001350 10031947532846001350 Yes Department of Microbiology, Shi.C., Islamic Azad University, Shiraz, Iran گروه میکروبیولوژی، واحد شیراز، دانشگاه آزاد اسلامی، شیراز، ایران